Анализ крови после укуса клеща – надежный метод своевременного обнаружения инфекции

ПЦР-диагностика “клещевых” инфекций

Комплексное исследование крови, в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляют возбудителей боррелиоза (Borrelia burgdorferi), моноцитарного эрлихиоза человека (Ehrlichia chaffeensis) и анаплазмоза человека (Anaplasma phagocytophilum).

ПЦР-диагностика боррелиоза, эрлихиоза и анаплазмоза.

Tick-borne diseases, polymerase chain reaction, PCR, Lyme disease, Human ehrlichiosis, Human anaplasmosis.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Клещевые инфекции представляют серьезную проблему для здоровья человека. Наибольшее значение имеют следующие клещевые инфекции:

  • болезнь Лайма (клещевой боррелиоз), возбудителем заболевания является спирохета Borrelia burgdorferi;
  • анаплазмоз, ранее известный как гранулоцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Anaplasma phagocytophilum.

В обоих случаях переносчиком инфекции являются иксодовые клещи Ixodess capularis, I. ricinus, I. pacificus и I. persulcatus. В России наибольшее значение имеют виды I. ricinus и I. persulcatus.

  • моноцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Ehrlichia chaffeensis. Переносчик инфекции – иксодовые клещи Amblyomma americanum.

Клещевые инфекции обладают рядом общих свойств:

  • Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно.
  • Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже тремя) патогенами (коинфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.

Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.

Для лабораторной диагностики клещевых инфекций могут применяться несколько методов, в том числе серологические тесты, анализ окрашенного мазка крови, бактериологический посев, иммуногистохимический анализ и методы молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в крови) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Исследование обладает целым рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации клещевых инфекций:

  • Быстрота получения результата. ПЦР – это один из самых быстрых на сегодняшний день методов идентификации возбудителя. Благодаря этому, метод ПЦР считается самым опитмальным способом диагностики острой инфекции.
  • Высокая чувствительность метода. Другой “быстрый” метод диагностики эрлихиоза – это окраска мазков крови по Гимзе. Обнаружение в мазках крови так называемых морул (скоплений микроорганизмов внутри лейкоцитов) – это характерный признак эрлихиоза и анаплазмоза. Морулы, однако, удается выявить не всегда: лишь в 3 % случаев моноцитарного эрлихиоза и 25-75 % случаев анаплазмоза. Чувствительность же ПЦР анализа достигает 85 % в отношении E. chaffeensis и 90 % в отношении A. phagocytophilum, что позволяет считать ПЦР самым точным среди быстрых методов диагностики клещевых инфекций.
  • Высокая специфичность (60-85 %). Специфичность метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов. Так как в ПЦР используются специфические для каждого из микроорганизмов праймеры, вероятность ложноположительного результата гораздо ниже.

Следует отметить ограничения метода ПЦР:

  • Так как в реакции определяется ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, метод ПЦР не предназначен для оценки эффективности лечения: результат будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени после начала эффективного лечения.
  • Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем других методов идентификации возбудителя, зависит от приема антибиотиков. Наиболее точный результат, однако, будет получен при взятии образца биоматериала до начала лечения антибактериальными препаратами.

В диагностике клещевых инфекций также могут помочь дополнительные лабораторные исследования. Так, характерной чертой эрлихиозов является панцитопения и умеренное повышение печеночных трансаминаз. При тяжелом течении заболевания могу наблюдаться гипонатриемия, гипокальциемия, гипомагниемия, повышение креатинина и мочевины и признаки ДВС-синдрома.

Следует отметить, что иксодовые клещи также являются переносчиками вируса клещевого энцефалита. При необходимости это комплексное ПЦР-исследование может быть дополнено исследованием на вирус клещевого энцефалита.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики боррелиоза, моноцитарного эрлихиоза и анаплазмоза.

Когда назначается исследование?

  • При наличии у пациента гриппоподобного синдрома (лихорадки, головной боли, миалгии и артралгии) в сочетании с указанием на укус клеща;
  • при обнаружении у пациента с лихорадкой “лабораторных” признаков клещевых инфекций: панцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

  • боррелиоз (Borreliaburgdorferi), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlichiachaffeensis) и/или анаплазмоз человека (Anaplasmaphagocytophilum).
  • Исследование не предназначено для оценки эффективности лечения заболевания.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, врач общей практики.

Литература

  1. Ismail N, Bloch KC, McBride JW. Human ehrlichiosis and anaplasmosis. Clin Lab Med. 2010 Mar;30(1):261-92.
  2. Swanson SJ, Neitzel D, Reed KD, Belongia EA. Coinfections acquired from ixodes ticks. Clin Microbiol Rev. 2006 Oct;19(4):708-27.

Анализы на боррелиоз и клещевой энцефалит: показания, методы исследования и расшифровка результатов

Клещевой вирусный менингоэнцефалит может протекать в особо тяжелых формах, вплоть до летального исхода. На первой стадии развития болезни он схож с другими опасными заболеваниями, такими как клещевой боррелиоз, острый полиомиелит, серозный менингит, сыпной тиф, японский комариный энцефалит. Поэтому крайне важна ранняя дифференциальная диагностика, позволяющая однозначно установить истинную причину нарастающих симптомов. Необходимость дифференцировать вирусный энцефалит и боррелиоз объясняется также тем, что эти два заболевания характерны для одних и тех же регионов и возникают они после присасывания клеща в весенне-летний период.

Если при нахождении в эндемичном регионе вы обнаружили на теле клеща, следует незамедлительно провести лабораторные исследования биоматериала, а в случае положительного результата — принять экстренные меры в ближайшие 4 суток после укуса насекомого, обратившись к инфекционисту или терапевту. В нашем обзоре мы рассмотрим, какие методы диагностики существуют и какие показатели анализов на энцефалит и боррелиоз являются сигналом к безотлагательным действиям.

Боррелиоз и энцефалит: что это и в каких случаях следует сдать анализ на наличие инфекции

Среди десятков заболеваний, переносчиками которых являются клещи, двумя — энцефалитом и боррелиозом (болезнью Лайма) — можно заразиться, не покидая территории России. Эти инфекционные болезни часто путают, а между тем, они совершенно разные. Клещевой энцефалит имеет вирусное происхождение, а клещевой боррелиоз — бактериальное. Оба заболевания поражают ЦНС, но болезнь Лайма — также суставы, кожный покров, сердечную мышцу. Энцефалит протекает преимущественно в острой форме, боррелиоз склонен к хронизации. Энцефалит оставляет устойчивый и продолжительный иммунитет, болезнь Лайма вызывает замедленный иммунный ответ с каскадным развитием аутоиммунных реакций, поэтому следующее заражение боррелиозом возможно уже спустя 7 лет. По мере развития каждая болезнь приобретает собственные ярко-выраженные симптомы.

Вирус семейства флавивирусов из группы арбовирусов, вызывающий клещевой энцефалит , передается через укусы таежного (Ixodes Persulcatus) и европейского лесного, или «собачьего», (Ixodes Ricinus) иксодовых клещей, хотя известны случаи заражения через ЖКТ при употреблении сырого молока инфицированных коз, овец и коров. Существует несколько штаммов вируса клещевого энцефалита, среди которых российские эпидемиологи выделяют центрально-европейский , сибирский и дальневосточный субтипы . Последний наиболее опасен — летальность достигает отметки 20–40%, тогда как при заражении центрально-европейским субтипом вируса она не превышает 1–3%. Вирус является нейротропным, то есть поражает центральную и периферическую нервную систему, способен преодолевать гематоэнцефалический барьер, поражая либо не поражая головной мозг.

По мере развития вируса происходят постепенные, зачастую необратимые изменения в сосудах и оболочках мозга. Первые две недели болезнь протекает бессимптомно. К 3-й неделе появляются высокая температура, головная и мышечная боль, тошнота, отсутствие аппетита. У четверти заболевших эти симптомы возникают еще позднее, спустя месяц после заражения. С течением времени боли усиливаются. Появляются судороги, паралич конечностей, дезориентация, потеря сознания, кома. При отсутствии помощи — летальный исход.

В зависимости от преобладания тех или иных симптомов, различают несколько форм течения клещевого энцефалита. Наиболее тяжелые, очаговые, формы чаще встречаются на территории Дальнего Востока, наиболее легкие, неочаговые, формы превалируют в центрально-европейской части России (см. табл. 1).

Таблица 1 . Клинические формы течения клещевого энцефалита

Клиническая формаТяжестьТечениеПрогноз
Неочаговые формы
•СтертаяЛегкая формаОстроеПолное выздоровление
•ЛихорадочнаяСредней степениВыздоровление с неврологическим дефицитом
•МенингеальнаяТяжелая форма
Очаговые формы
•ЭнцефалитическаяСредней степениОстроеПолное выздоровление
•МенингоэнцефалитическаяПервично-хроническоеВыздоровление с неврологическим дефицитом
•ПолиоэнцефалитическаяТяжелая формаВторично-хроническое
•ПолиомиелитическаяСтабильноеХронизация
•ПолиоэнцефаломиелитическаяПрогредиентное (с нарастанием симптоматики)Летальный исход
•Полирадикулоневритическая

Боррелиоз (болезнь Лайма) у человека развивается после попадания внутрь бактерии с одноименным названием — боррелия. В России распространены два вида этих грамотрицательных спирохет — Borrelia afzelii и Borrelia garinii . В первые секунды бактерии подвергаются атаке со стороны иммунной системы человека, поэтому быстро «уходят» туда, где активность иммунитета не столь высока: сухожилия, сердце, нервные ткани. Из-за этого у боррелиоза, в отличие от энцефалита, часто отсутствует острая стадия. Болезнь быстро становится хронической. Главный отличительный признак — мигрирующая кольцевидная эритема. Это ярко-красное пятно в месте укуса, которое постепенно увеличивается, образуя кольца. Кожа начинает шелушиться, возникает некроз. Не исключены вторичные эритемы на других частях тела, носящие аллергический характер. В то же время существуют формы течения болезни без эритемы, но с лихорадкой и интоксикацией. В этом случае болезнь Лайма становится практически неотличимой от клещевого энцефалита.

Через месяц появляются признаки поражения нервной системы: дефекты речи, частичный паралич конечностей, перепады в настроении. У некоторых больных развивается менингит, нарушаются сердечные ритмы. Если болезнь оставить без внимания, через год начнет прогрессировать потеря слуха, артрит, невралгия, сильная затрудненность речи, потеря ориентации в пространстве.

Боррелиоз хорошо лечится, и главное в этом деле — не допустить перехода заболевания в диссеминированную (распространенную, рассеянную) или хроническую стадию (см. табл. 2). Больному назначают антибиотики на протяжении 2–4 недель, своевременный прием которых практически гарантирует полное выздоровление.

Таблица 2 . Клинические стадии и формы болезни Лайма

Сезон клещей: как защититься и что делать, если вас укусили

С первым весенним теплом начинается сезон клещей. Вопреки распространенному заблуждению, клещи активны не только жарким летом. Сезон активности этих паразитов длится с ранней весны до поздней осени, и из-за мягких зим этот период только увеличивается. Как не допустить укуса клеща? Почему это опасно? И что делать, если клещ уже укусил?

Чем опасен укус клеща?

Группа иксодовых клещевых инфекций, возбудители которых передаются клещами рода Ixodes, включает в себя клещевой энцефалит (вирус клещевого энцефалита), иксодовые клещевые боррелиозы (Borrelia burdorferi sensu lato), гранулоцитарный анаплазмоз человека (Anaplasma phagocytophilum), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlihia chaffeensis, Ehrlihia muris).

Сезон активности иксодовых клещей начинается в последней декаде апреля и продолжается в средней полосе России до октября, а в Приморье — до ноября.

Согласно статистике, в 80% случаев от укусов клещей страдают именно горожане, 30% из них — дети, которые наиболее тяжело переносят укус клещей и инфекции, которые они переносят.

Клещи — природный резервуар инфекций и вирусов. После укуса, через слюну членистоногого (клещи – не насекомые, а, по сути, родственники пауков), в кровь человека попадает «коктейль» из возбудителей. Слюна клещей обладает определенным анестезирующим действием, поэтому укус не ощущается. Важно понимать, что чем дольше длится контакт с клещом, тем выше риск заражения.

Как не допустить укуса клеща

Правила удаления клеща

Если вас укусил клещ, важно правильно удалить его и в течение 24 часов доставить на исследование.

  1. Извлеките его, используя нитку или специальное устройство (клещ-отвертка, клещевая ручка-лассо).
  2. Если используете нитку, накиньте петлю на тело клеща ближе к хоботку, сделайте еще одну, для прочности. Медленно выкрутите клеща против часовой стрелки. Старайтесь не оторвать головку и не раздавить его.
  3. При использовании специального устройства захватите им клеща ближе к голове и вращайте против часовой стрелки до полного удаления из места укуса.
  4. После удаления обработайте ранку антисептиком, клеща поместите в стерильный контейнер с ватно-марлевым тампоном.
  5. Доставьте клеща в медицинский центр СИТИЛАБ на исследование в течение 24 часов. Разрешается хранить клеща с момента снятия не более суток при температуре +4…+8 °С.

* Исследованию подлежат клещи, снятые только с человека.

* Недопустимо клещей, снятых с нескольких человек, помещать в одну емкость.

Сдать клеща на анализ в СИТИЛАБ

В любом медицинском центре СИТИЛАБ вы можете сдать клеща на анализ для выявления 4 основных опасных для человека возбудителей вирусных инфекций (код исследования: 97-58-015). Это клещевой энцефалит, боррелиоз, анаплазмоз, эрлихиоз.

При лечении клещевых инфекций важен каждый день, поэтому, если укусил паразит, как можно скорее обратитесь за помощью. Разные инфекции требуют разного подхода в лечении, даже несмотря на схожую клиническую картину. Лабораторная диагностика поможет определить точный патоген. На основе результатов врач подберет эффективную терапию.

Какой алгоритм диагностики?

Первый шаг – аккуратно извлечь клеща и как можно скорее отнести его в лабораторию. Если в клеще не обнаружены возбудители инфекции, рекомендуется наблюдение за самочувствием в течение первых 30 дней после укуса. При появлении клинических симптомов инфицирования (покраснение в месте укуса, повышение температуры, головные, мышечные боли, общее недомогание) рекомендуется обратиться к врачу-инфекционисту.

Если Вас укусил клещ, в котором обнаружены соответствующие возбудители, переносимые иксодовыми клещами, примите срочные меры, которые позволят предотвратить или существенно снизить тяжесть клинических проявлений инфекций. При обнаружении в клеще вируса энцефалита проводится экстренная серопрофилактика в специализированных Центрах экстренной серопрофилактике (не позднее четвертого дня после присасывания клеща). Как можно скорее обратитесь к врачу.

Если клещ оказался непригоден для лабораторной диагностики, рекомендуется сдать ПЦР-анализ крови на инфекции, переносимые клещами (код исследования: 97-10-015). Анализ информативен через 10-14 дней с момента укуса для дифференциальной диагностики.

Для наблюдения в динамике, в случае возможности развития клещевого энцефалита и боррелиоза, рекомендуется после укуса клеща:

  • не ранее 7 дней исследовать кровь на наличие иммуноглобулинов IgM: Антитела к вирусу клещевого энцефалита IgM (код исследования: 43-20-141)
    Антитела к Borrelia IgM (болезнь Лайма, боррелиоз, код исследования: 45-20-110)
  • при наличии прививки от клещевого энцефалита и боррелиоза сдать кровь на иммуноглобулины IgG, чтобы оценить наличие и выраженность иммунитета: Антитела к вирусу клещевого энцефалита IgG (код исследования: 43-20-140)
    Антитела к Borrelia IgG (болезнь Лайма, боррелиоз, код исследования: 45-20-109)
  • через 1,5-2 недели провести повторное исследование крови на IgG.

Комплексное исследование на клещевые инфекции: боррелиоз, клещевой энцефалит, эрлихиоз, анаплазмоз (ПЦР, клещ, кач.) в Москве

Исследование иксодового клеща на наличие генетического материала возбудителей инфекций, передающихся человеку при укусе: боррелиоза (болезни Лайма), вирусного клещевого энцефалита, моноцитарного эрлихиоза, гранулоцитарного анаплазмоза. Анализ проводится методом ПЦР, результаты предоставляются в качественном формате.

  • Об исследовании Обзор
  • Как подготовиться? Подготовка
  • Расшифровка Результат
  • Приём, исследование биоматериала
  • Показания к назначению
  • Описание

Приём и исследование биоматериала

  • Можно сдать в отделении Гемотест
  • Можно сдать анализ дома

Когда нужно сдавать анализ Комплексное исследование на клещевые инфекции: боррелиоз, клещевой энцефалит, эрлихиоз, анаплазмоз (ПЦР, клещ, кач.)?

1. Укус иксодового клеща
2. Подозрение на клещевые инфекции

Подробное описание исследования

Инфекции, переносимые иксодовыми клещами опасны, а их симптомы сходны между собой. Некоторые клещи могут переносить возбудителей сразу нескольких заболеваний, что осложняет течение болезни и затрудняет диагностику.

Клещевой энцефалит – вирусная инфекция, поражающая ткани головного и спинного мозга и/или их оболочек. Заболеть можно тогда, когда иксодовые клещи активны: весной и летом. В среднем по стране вирус переносят 6 из 10 клещей, но из-за неравномерности распространения данных насекомых, вероятность инфицирования варьируется в зависимости от местности. Края, в которых укус клеща с большой вероятностью грозит энцефалитом, называются эндемичными. Суммарно на таких территориях проживает половина населения страны. Мы подготовили наглядную иллюстрацию распространенности клещевого энцефалита в России по регионам.
https://www.gemotest.ru/news/119135/

Полный список эндемичных по клещевому энцефалиту территорий приведен на сайте Роспотребнадзора (http://www.mossanexpert.ru/novosti/?ELEMENT_ID=3386)

Заболеть можно не только от укуса клеща. Носителями и источником заражения могут быть домашние животные и птицы. Так, инфицироваться можно при употреблении сырого козьего или коровьего молока. А вот от человека к человеку клещевой энцефалит не передается.

При попадании вируса в кровь клетки иммунной системы захватывают его, но обезвредить не могут. В них он размножается, новые вирусные частицы попадают в лимфоузлы, селезенку, печень, где происходит повторное размножение. Когда удалось увеличить количество вирусных частиц, вирус попадает в клетки нервной системы и мозговых оболочек.
Клинически болезнь начинается остро после инкубационного периода (7-35 дней). Симптомы нарастают стремительно: температура поднимается до 38-39 оС, возникает чувство озноба. Появляются слабость, сонливость, головная и мышечные боли, возможно – рвота. Все это длится 2-4 дня, после чего наступает облегчение, которое можно принять за выздоровление. Иногда так и есть, но у 20-30% через неделю симптомы возобновляются. Из-за поражения нервной системы добавляются неврологические патологии. Возникают двигательные нарушения: руки и ноги начинают подергиваться или дрожать, иногда наоборот – двигательная активность усложняется вплоть до паралича, возникает скованность затылочных мышц, которая проявляется в невозможности наклонить голову или достать подбородком до груди. Для дальневосточного подтипа клещевого энцефалита период заболевания не характерен: болезнь начинается еще более остро, нервная система поражается уже на 3-5 день. Летальность от этого подтипа заболевания выше: 20% против 2% от описанной выше европейской формы.

Чтобы предотвратить заболевание, люди, проживающие в эндемичных региона или въезжающие в них, делают прививку. Иммунитет к клещевому энцефалиту формируется на месяц. Если зараженный клещ укусил человека, ему вводят противоэнцефалитную сыворотку. Она эффективна лишь в течение 4 суток от момента присасывания клеща. Это – меньше времени инкубационного периода, поэтому для своевременных мер по профилактике инфекции, в случае укуса клещом, его необходимо сдать в лабораторию на анализ, не дожидаясь проявлений болезни.

Болезнь Лайма (бореллиоз) – самая распространенная болезнь, которую переносят клещи в Северном полушарии. Самое характерное проявление заболевания – кольцевидное покраснение в месте укуса, которое называется блуждающей эритемой. Эритема возникает в среднем на 7-10 день после укуса, хотя это происходит не всегда. Даже если покраснения не появилось, укус клеща – повод провести анализ клеща на Лайм-бореллиоз, не дожидаясь симптомов заболевания, которые в среднем наступают через две недели от момента укуса. Они включают в себя повышение температуры, слабость, головную и мышечную боли. Иногда появляется кашель, тошнота, рвота и диарея, часто отмечается боль в суставах. Как видите, они неспецифичны – по клинической картине сложно понять, что это именно болезнь Лайма. Чаще всего, в результате поражаются суставы, нервная система и кожные покровы. От своевременной постановки диагноза зависит эффективность терапии и исход заболевания: без лечения оно может привести к инвалидизации и даже смерти.

Неспецифичность симптомов связана с тем, что возбудитель заболевания – спиралевидная бактерия (спирохета) рода Borrelia поражает разные ткани и органы. Спирохеты попадают в организм человека со слюной клеща при укусе.

Заразиться можно с мая по сентябрь, особенно вероятно в местах, эндемичных по клещевому энцефалиту. Если иксодовый клещ переносит возбудителей обоих заболеваний, может возникнуть смешанная инфекция.

Два других заболевания, переносимые иксодовыми клещами – гранулоцитарный анаплазмоз и моноцитарный эрлихиоз. Это бактериальные заболевания. Возбудитель первого из них – Anaplasma phagocytophilum, поражает гранулоциты, клетки иммунной системы. Вторая болезнь вызывается бактериями рода Ehrlichia, они размножаются в моноцитах. Отсюда и названия этих заболеваний. Симптомы этих инфекций неспецифичны и схожи между собой: повышение температуры, слабость, головные боли. Обычно они начинают проявляться в течение 12 дней после укуса клеща. При тяжелом течении болезни отмечают поражение кожи, печени, почек, центральной нервной системы, костного мозга. Инфекция имеет тяжелое течение и высокую смертность, особенно среди людей с ослабленным иммунитетом.

Осторожно, КЛЕЩ!

Весной, вместе с таянием снега, появляются не только подснежники. Вместе с первыми проталинами просыпаются клещи — кровососы. При нахождении на природе Вы можете не заметить наползание насекомого или кратковременный укус. Будьте осторожны! Осматривайте себя и своих близких, после того как вернулись домой. При присасывании – клещи переносят опасные болезни, такие как клещевой энцефалит, боррелиоз , а также в этот список входит ряд других инфекций.

Клещевой энцефалит – серьезное заболевание с поражением различных отделов нервных структур, которое может приводить к необратимым изменениям в виде параличей или даже летальному исходу. Боррелиоз также отличается комплексным нарушением нервной, сердечно-сосудистой, опорно-двигательной систем.
Паразиты могут становиться переносчиками возбудителей геморрагического васкулита – острого вирусного заболевания, при котором поражается кровеносная система, вызывая серьезные осложнения в виде внутреннего кровотечения.

Надо помнить опасен не только укус, но и наползание насекомого так как его инфицированная слюна, попадая на кожу через поры или царапины может проникнуть в кровь и вызывать заболевания.

Симптомы
Изначально симптомы укуса клеща могут быть выражены незначительно, кожа может выглядеть без визуальных изменений, а признаки нарастают впоследствии. Яркая клиническая картина характерна для детей, пожилых пациентов, а также людей с хроническими заболеваниями, которые негативно влияют на функции иммунитета.
Люди могут сначала не почувствовать признаки укуса клеща, так как в его слюне содержится обезболивающие.
Часто прогрессирование болезни сопровождается повышением температуры, учащением сердцебиения, воспалением лимфоузлов , сыпью на коже, зудом и покраснением в месте, где укусил клещ. Также часто укус членистоногого вызывает относительно безопасную аллергическую реакцию, которая не имеет ничего общего с серьезным эндемическим заболеванием. Важно обратиться к врачу-инфекционисту для диагностики состояний!
Аллергия на укус клеща сопровождается яркой местной реакцией на коже, заложенностью носа, слезоточивостью, покраснением глаз. Начало заболевания может напоминать грипп – появляется лихорадка, озноб, ломота в суставах и мышцах. Ухудшение работы сердечнососудистой системы приводит к перебоям в работе сердца, аритмии, одышке. Часто пациенты жалуются на изменения работы желудочно-кишечного тракта – тошноту и рвоту, отсутствие аппетита, послабления стула. Могут начинаться неврологические жалобы – эпизоды изменения сознания вплоть до эпилептических приступов. Несмотря на то, что возбудителями заболеваний становятся разные микроорганизмы, клинические картины похожи.

Что делать?
Если вы обнаружили клеща, незамедлительно удалите его, можно для этой манипуляции обратиться в районный травмпункт, или в круглосуточные кабинеты МЦ “Медпрактика” по адресам:

  • Новосибирск, ул.Красина 68
  • Новосибирск, ул. Немировича-Данченко 147
  • Бердск, ул.Первомайская 125
  • Бердск ул.Островского 53/1 или в наши медицинские офисы находящиеся по адресам:
    • г. Новосибирск, ул. Арбузова, 6
    • г. Новосибирск, ул. Богдана Хмельницкого, 45
    • г. Новосибирск, ул. Микрорайон Горский, 2
    • г. Новосибирск, ул. Ленина, 94
    • г. Новосибирск, ул. Титова, 40
    • г. Бердск, ул. Ленина, 28
    • г. Кемерово,ул. Кирова, 23

    Рекомендации для самостоятельного удаления клеща.
    Не давите клеща, так как вирусы находятся в его внутренностях.
    Не отрывайте клеща, поскольку вирус клещевого энцефалита концентрируется в его слюнных железах.
    Ни в коем случае не извлекайте клеща зубами.
    Не смазывайте клеща маслами, кремами и т.д.
    Удалять клеща в домашних условиях можно двумя способами:
    Обвяжите клеща ниткой как можно ближе к хоботку, растяните ее концы в стороны и осторожно, без резких движений, аккуратно потяните концы нитки вверх до полного извлечения клеща.
    Второй способ при помощи пинцета. Аккуратно зажмите клеща пинцетом ближе к коже, медленными, раскачивающими (из стороны в сторону) движениями, тяните насекомое вверх. Не вырывайте и не крутите, иначе головка с хоботком может остаться в ране.
    После извлечения клеща продезинфицируйте место укуса: спиртом 70%, 5% йодам, одеколоном и т.д. Вымойте руки в теплой воде с мылом.

    Правила транспортировки и хранения:
    Для анализов пригодны только целые клещи. Удаленного насекомого поместить в чистую посуду (подойдет баночка, пузырек, пробирка и т.п.). В тару предварительно поместить чуть смоченную салфетку, для создания повышенной влажности. Тару плотно закрыть и поместить в холодильник, хранить клеща при температуре +2+4, возможно 2 суток. Чем быстрее сделан анализ, тем надежнее результат.
    Даже если укус был кратковременным, риск заражения инфекциями, передающимися через клеща, может быть очень высок. Удалив клеща, сохраните его для исследования на зараженность. Однако, необходимо понимать, что отсутствие инфекции у клеща не означает, что человек не заболеет т.к. находясь в очаге обитания клещей возможно наползание насекомого, по этому крайне необходимо на 7-14 день сдать кровь на ранние антитела. Анализ клеща нужен для спокойствия в случае отрицательного результата и бдительности в случае положительного.
    Лаборатория Сиблабсервис предлагает следующие комплексы исследований клеща:
    87.08 Комплексное исследование клеща (РНК Tick-borne encephalitis Virus, ДНК Borrelia burgdorferi s.l., ДНК Anaplasma, ДНК Ehrlichia) с дифференцировкой.
    88.39 Комплексное исследование клеща (РНК Tick-borne encephalitis Virus, ДНК Borrelia burgdorferi s.l., ДНК Anaplasma, ДНК Ehrlichia, ДНК Babesia species, ДНК Rickettsia species) с дифференцировкой.
    88.41 Комплексное исследование клеща (РНК Tick-borne encephalitis Virus, ДНК Borrelia burgdorferi s.l., ДНК Borrelia miyamotoi, ДНК Anaplasma, ДНК Ehrlichia, ДНК Babesia species, ДНК Rickettsia sibirica, ДНК).

    87.09 Комплексное исследование крови (РНК Tick-borne encephalitis Virus, ДНК Borrelia burgdorferi s.l., Anaplasma, Ehrlichia) с дифференцировко.,
    88.45 Комплексное исследование крови (РНК Tick-borne encephalitis Virus, ДНК Borrelia burgdorferi s.l., ДНК Anaplasma, ДНК Ehrlichia, ДНК Babesia species, ДНК Rickettsia species) с дифференцировкой.
    88.46 Комплексное исследование крови (РНК Tick-borne encephalitis Virus, ДНК Borrelia burgdorferi s.l., ДНК Borrelia miyamotoi, ДНК Anaplasma, ДНК Ehrlichia, ДНК Babesia species, ДНК Rickettsia sibirica).
    Ваши результаты будут известны через 36 часов.
    Не ранее чем через 7-14 дней после укуса или наползания клеща исследуют кровь методом ИФА на ранние антитела к вирусу клещевого энцефалита (IgM) и ранние антитела к боррелиозу (Болезнь Лайма) (IgM) :
    04.82 Боррелиоз ; болезнь Лайма (Borrelia burgdorferi) lgM,
    04.68 Клещевой энцефалит (Tick-borne encephalitis Virus) IgМ .
    Срок готовности исследования 2 дня, не считая день забора.
    Для определения поздних антител к вирусу клещевого энцефалита (IgG) и поздних антител к боррелиозу (Болезнь Лайма) (IgG) кровь сдается на 14 -21 день после укуса или наползания клеща, пик вырабатывания поздних антител приходиться на 30 сутки и держится на высоком уровне в течении 2-6 месяцев после инфицирования. Так же можно проводить мониторинг на поздние антитела после вакцинации от клещевого энцефалита:
    04.27 Боррелиоз ; болезнь Лайма (Borrelia burgdorferi) lgG.
    04.67 Клещевой энцефалит (Tick-borne encephalitis Virus) IgG
    Срок готовности исследования 2 дня не считая день забора.
    Следует помнить, что вакцинация против клещевого энцефалита не исключает всех остальных мер профилактики укусов клещей, посещая лес, пользуйтесь репеллентами и надежной экипировкой. Помните, клещ является переносчиком не только клещевого энцефалита, но и возбудитель других инфекций, от которых нельзя защититься вакциной. Свернуть >>

    “Микробиология 21 века”

    Прошел год c тех пор, как в нашей лаборатории был установлен масс-спектрометр «Бактоскрин» для идентификации микроорганизмов – разработка московской компании НПФ Литех, первый отечественный анализатор. Это вывело микробиологические анализы на совершенно иной уровень.

    Для того, чтобы понять, насколько значимым было это изменение, необходимо иметь представление о том, как в настоящее время проводятся микробиологические анализы в подавляющем большинство лабораторий.

    Начинается любое исследование с того, что биологическим материалом, взятым у пациента, засевают чашки с питательной средой, которые помещают в термостат. Микроорганизмы, содержащиеся в биоматериале, начинают усиленно расти и размножаться. Читать далее >>

    На рисунке изображены два вида колоний, выросшие на питательной среде. Врач-микробиолог должен определить, какие именно это бактерии, чтобы лечащий врач мог назначить лечение.

    Через сутки невидимые ранее микроорганизмы вырастают, их колонии становятся хорошо видны. Но что именно выросло на чашке – на этот вопрос предстоит ответить врачу микробиологу. Колонию кишечной палочки узнает даже начинающий врач. Но, к сожалению, в образцах растет не только кишечная палочка. Во многих случаях, чтобы определить, какие именно микробы образовали колонию, т.е. какие именно микробы содержались в образцах, необходимо проводить специальные исследования. Для этого выросших микробов окрашивают специальными красителями, рассматривают под микроскопом, засевают ими наборы различных сред, а потом в течение нескольких дней наблюдают, какие изменения будут происходить в этих средах в результате жизнедеятельности микробов.

    Рисунок показывает набор пробирок, содержащих различные углеводы. Потребление микробом конкретного углевода приводит к изменению окраски добавленного индикатора, поэтому такой набор называют «пестрый ряд». Врач определяет, каким именно микробом был засеян ряд в зависимости от того, в каких пробирках произошло изменение цвета.

    Что было бы, если бы подобные методы использовались бы для идентификации людей – например, полицейскими? Представьте себе, полиция задержала подозреваемого и хочет его опознать так, как это делают микробиологи с микробами. Для этого подозреваемого селят в гостиницу и несколько дней наблюдают за ним – во сколько он ложиться спать, во сколько встает, что ест на завтрак. А еще собирают и анализируют отходы его жизнедеятельности.

    Нелепо, скажите вы. Но именно так обстоят дела в микробиологии! Врач в течение нескольких дней наблюдает за тем, какие изменения происходят в средах, в которых растет микроб. Как меняется окраска индикаторов, происходит ли выделение пузырьков и т.д. Потом, учитывая все изменения, по специальным таблицам врач определяет, к какому роду и виду относиться микроб.
    Недостатки данного метода очевидны:
    – Во-первых и в главных – время. Необходимо несколько дней, чтобы определить таким образом микроорганизм, и эти несколько дней врач не может начать лечение, не зная, от чего лечить.
    – Во-вторых – точность. Упомянутые таблицы содержат несколько сотен наименований микробов – а всего человеческий организм могут населять тысячи и десятки тысяч различных микробов.

    К счастью, никто не помещает подозреваемых в гостиницу и не наблюдает за ними по несколько дней. У полицейских есть такой мощный инструмент, как дактилоскопия. Отпечаток пальцев каждого человека индивидуален. Поэтому, взяв отпечаток пальца и сравнив его отпечатками, хранящимися в базе данных, полиция без труда идентифицирует человека (если, конечно, его отпечаток есть в базе).

    А что же микроорганизмы? Ученые установили, что набор рибосомальных белков любого микроорганизма уникален, как уникален рисунок капиллярных линий у человека. Если научиться определять состав белков микроба, то идентифицировать его будет также просто, как человека по отпечатку пальца.

    Впервые для опознания преступника дактилоскопия была применена в 1902 г. Ровно через 100 лет, в 2002 г., японский ученый Коити Танака получил Нобелевскую премию за исследования, позволившие создать революционный метод идентификации микробов, называемый иногда «протеомная дактилоскопия».

    Сравнительно недавно у биологов появился инструмент, который позволяет это делать. Таким образом, стал возможен принципиально другой способ идентификации микробов. Теперь вместо того, чтобы рассеивать микробы по набору различных сред и в течение несколько суток наблюдать за ними, выросшую колонию наносят на стальную мишень. Сверху наслаивается специальное вещество – матрица. Затем лазерная вспышка превращает живой организм в набор ионов. Состав этих ионов анализируется масс-спектрометром, измеряется масс-спектр набора белков. Как мы уже знаем, этот масс-спектр уникален для каждого вида микроба, как отпечаток пальца для человека (поэтому этот метод еще называют «протеомная дактилоскопия»). Программное обеспечение осуществляет поиск подходящего спектра в базе данных, в которой хранятся сведения о нескольких тысячах микроорганизмов – бактерий, микобактерий, мицелиальных и дрожжевых грибов.

    Использование матрицы позволило применить метод масс-спектрометрии для анализа биологических объектов. Масс-спектр работает с ионами – т.е., фактически, с плазмой. Типичный пример плазмы – дуга электросварки. Представьте себе, что произойдет с живым существом, оказавшимся внутри дуги. И здесь на помощь приходит матрица. Ее молекулы поглощают энергию лазерной вспышки, «вскипают» и увлекают за собой молекулы белка, защитив их от разрушения лазером.

    Таки образом, от нанесения образца на мишень до получения результата проходит несколько минут. Сравните это с несколькими сутками, которые требуются в традиционном методе.

    Так выглядит белковый масс-спектр – аналог отпечатка пальцев человека. Слева изображен первый отечественный масс-спетрометрический биоанализатор Бактоскрин.

    Это означает, что уже через сутки после первичного посева врач-микробиолог может определить возбудителя заболевания и начать исследование по устойчивости к антибиотикам. При этом точность определения будет намного выше. База данных прибора содержит в десять раз больше микроорганизмов, чем таблицы, используемые в традиционных методах.
    Расширенная база данных дает возможность определять микробы, которые невозможно определить традиционными методами. За истекший год эксплуатации прибора наши врачи не однократно идентифицировали микроорганизмы, которые отсутствуют в обычных справочниках врачей-микробиологов. Если бы образцы этих пациентов анализировались традиционными методами, микробы остались бы не идентифицированным. А это уже прямая угроза для здоровья. Неизвестный микроб может быть сапрофитом кожи, не требующим лечения, как например, Brevicbacterium, а может быть патогенном, требующим эродикации (уничтожения), как, например Pasteurella multocida. Или найденная в ране одного из пациентов Aeromonas hydrophila. Данная бактерия обитает в теплых южных морях, не определяется традиционными методами, хотя является весьма патогенной для человека. Использование же масс-спектрометра позволило определить эти и ряд других бактерия, отсутствующие в стандартных справочниках.

    Безусловно, будущее микробиологических исследований связано с масс-спектрометрической идентификацией. Данный метод превосходит любой существующий в настоящее время – и по скорости и по качеству определения. В настоящее время лаборатория «Сиблабсервис» – единственная в Новосибирске, использующая масс-спектрометрию для коммерческих бактериологических анализов. Единственное место в Новосибирске, где будущее наступило уже сегодня.

    ПЦР диагностика клещевого энцефалита

    Клещевой энцефалит

    Что же такое клещевой энцефалит?

    Клещевой энцефалит – природно-очаговая острая вирусная инфекция с преимущественным поражением центральной нервной системы. Заболевание вызывается вирусом, который попадает в тело клеща от диких животных, на которых он паразитировал до попадания на человека.

    Пути заражения ВКЭ.
    • При укусе клеща,
    • Через микротрещинки на коже при пребывании насекомого на теле человека,
    • Употребление в пищу сырого козьего и коровьего молока.
    Развитие заболевания.

    От момента укуса клеща до момента развития болезни проходит в среднем от 7 до 21 дней.

    Клинически клещевой энцефалит, как правило, развивается в острой циклической форме с выздоровлением.

    Тяжелые осложнения острой инфекции (это в первую очередь территориально относится к Дальнему Востоку России) часто могут завершиться параличом и летальным исходом.

    Хроническая инфекция клещевого энцефалита с поражениями мозга протекает годами или пожизненно.

    Диагностика ВКЭ.
    • по комплексной симптоматике,
    • по наличию укуса клеща в анамнезе,
    • по наличию специфических антител ( методом ИФА).
    • по выявлению вирусной РНК методом ПЦР (полимеразная цепная реакция). ПЦР – высокочувствительный метод молекулярной диагностики – позволяет выявить ДНК или РНК возбудителя заболевания в крови и другом исследуемом материале.
    ПЦР-диагностика:

    Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) – это прямой метод диагностики, т.е. метод, позволяющий напрямую определить наличие ДНК/РНК инфекционного возбудителя заболевания. С помощью этого метода можно посмотреть есть ли вирус клещевого энцефалита в биологическом материале (крови или плазме).

    Преимущества ПЦР:
    • Более чувствительный и специфичный тест по сравнению с ИФА в случаях отсутствия антител или низкого уровня продукции их у части больных (в титрах не выше 1:640);
    • Позволяет выявить возбудитель в малом количестве пробы;
    • Высокая скорость проведения анализов;
    • Возможность раннего контроля результатов и эффективности проведенного лечения;
    • Возможность прогноза риска заболевания клещевым энцефалитом:
    • Возможность диагностики серонегативной формы клещевого энцефалита, затяжной реконвалесценции, прогноза второй волны лихорадки клещевого энцефалита;
    • Наиболее надежный способ выявления хронического клещевого энцефалита. По клиническим данным, частота трансформации в хроническую инфекцию составляет 3–11% к общему числу заболеваний острым клещевым энцефалитом.

    Вирус клещевого энцефалита чаще всего попадает в организм человека при укусе клеща. Кожа и подкожная клетчатка являются местом первичного размножения вируса клещевого энцефалита. Затем, проникая через капилляры в систему крово- и лимфообращения, вирус начинает размножаться в эпителии кровеносных и лимфатических сосудов, лейкоцитах крови и т.д.

    В этот период, в первые 1-4 дня после укуса клещом в крови можно наиболее часто – в 54,7% случаев – обнаружить вирус клещевого энцефалита методом ПЦР. На 5-10-й день после укуса вероятность обнаружения вируса клещевого энцефалита из крови снижается до 9,6% случаев, а на 11-20 день снова возрастает до 25%. По истечении 20 дней и далее вирус обнаруживается в крови снова с низкой частотой – в 6,3% случаев.

    Такая особенность выявления вируса из крови инфицированных лиц во времени может отражать волнообразный характер вирусемии, клинически проявляющейся лихорадкой.

    Материал для исследования может служить кровь, сыворотка крови, моча, слюна, ликвор, соскобы со слизистой, культур клеток и пр.).

    В медицинском центре «Статус» проводится забор венозной крови для ПЦР диагностики клещевого энцефалита. Анализ выполняют специалисты лаборатории генодиагностики БиоЛинк в течение 2 дней.

    Иксодовые клещевые боррелиозы

    Возбудители боррелиозов относятся к порядку Spirochaetales, семейству Spirochaetaceae, роду Borrelia. В группу иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) входят заболевания, вызываемые в большинстве случаев тремя представителями комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato: B.burgdorferi, B.garinii и B.afzelii. Изучается патогенный потенциал других боррелий комплекса: B.valaisiana, B.lusitaniae, B.bissettii, B.sinica. Ареал распространения этих видов боррелий в основном совпадает с территорией обитания клещей I.persulcatus и I.ricinus, играющих одновременно роль переносчика и резервуара инфекции. Спонтанная инфицированность боррелиями клещей вида:

    I. ricinus составляет в среднем 20%, клещей I.persulcatus – 40%. Сезон активности иксодовых клещей начинается в последней декаде апреля и продолжается в средней полосе России до октября, а в Приморье – до ноября. ИКБ распространен в России на 69 административных территориях, наибольшая заболеваемость регистрируется в Кировской, Томской и в последние годы – Вологодской и Ярославской областях. Клинически выраженное заболевание развивается приблизительно в 20% случаев после присасывания инфицированных боррелиями клещей. В результате попадания боррелий в кожу у 50–80% больных отмечается местное кожное воспаление – клещевая мигрирующая эритема, диаметр которой, как правило, превышает 5 см. В 20–50% случаев заболевания эритема отсутствует в начале заболевания и таким образом сразу развивается диссеминированная стадия ИКБ, которая носит название безэритемной формы. В случае гематогенного распространения боррелии поражают внутренние органы, что сопровождается развитием общеинфекционного синдрома и клиническими проявлениями со стороны висцеральных органов (печени, селезенки, сердца, почек). В случае поражения нервной системы возникают менингит (менингоэнцефалит), радикулоневрит, неврит черепных нервов. Наиболее часто поражается VII пара черепных нервов, нередко с парезом лицевых мышц, что является еще одним, кроме эритемы, характерным признаком ИКБ. В ряде случаев, особенно при поздно начатом лечении, заболевание переходит в третью – хроническую – стадию, для которой в настоящее время доказана только одна клиническая форма – хронический атрофический акродерматит. Следует отметить, что у определенной части больных не наступает полное выздоровление в течение длительного времени после острого периода, может до двух лет сохраняться субфебрилитет, длительно – артриты, прогрессирующий энцефаломиелит, энцефалопатии, патологические изменения со стороны сердечно-сосудистой системы.

    Показания к обследованию

    • Обращение пациента за медицинской помощью с апреля по октябрь;
    • факт присасывания клеща или пребывание на природе: в лесной, лесопарковой зоне, в загородных домах и прилегающих к ним территориях;
    • развитие общеинфекционного синдрома;
    • появление мигрирующей эритемы.

    Дифференциальная диагностика. Инфекционные заболевания, передаваемыми иксодовыми клещами; рожистое воспаление; склеродермия; артрит ревматоидный или иной этиологии; миокардит; заболевания ЦНС иного генеза.

    Материал для исследований

    • Биоптаты кожи – микроскопические исследования, изоляция боррелий культуральным методом, обнаружение ДНК;
    • цельная кровь – изоляция боррелий культуральным методом, обнаружение ДНК;
    • сыворотка крови – выявление специфических АТ;
    • СМЖ – выявление специфических АТ (при развитии серозных менингитов), изоляция боррелий культуральным методом, обнаружение ДНК;
    • моча – обнаружение ДНК;
    • синовиальная жидкость – выявление специфических АТ (при артритах), изоляция боррелий культуральным методом, обнаружение ДНК.

    Этиологическая лабораторная диагностика включает выявление возбудителя методом микроскопии, изоляцию боррелий с использованием культурального метода, обнаружение ДНК боррелий, выявление специфических АТ.

    Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Обнаружение специфических АТ IgM и IgG – наиболее часто используемый метод лабораторной диагностики ИКБ. Применение РНИФ позволяет обнаружить АТ у 40–50% больных в первые 2–4 недели заболевания, а при исследовании образцов крови в динамике, взятой с интервалом в 1–3 месяца, удается подтвердить ИКБ в 60–70% случаев. Диагностически значимым титром в данной реакции считается положительный результат при разведении сыворотки 1:40, а также четырехкратное нарастание титра АТ во второй из взятых проб относительно первой.

    При определении АТ методами ИФА, ИХЛА и т. п. в основном используются несколько (от 4 до 8) рекомбинантных АГ боррелий, относящихся к разным геновидам. Методы обладают большей диагностической чувствительностью в сравнении с РНИФ. АТ IgM начинают обнаруживаться к концу второй недели заболевания, АТ IgG – на 3–4-й неделе заболевания. Обнаружение АТ IgM отмечают у 50% больных с хронической формой ИКБ, что, видимо, связано с изменением антигенных детерминант во время персистенции боррелий в организме больного. Данные о диагностической чувствительности выявления АТ на разных стадиях заболевания приведены в таблице.

    Диагностическая чувствительность определения специфических антител при ИКБ

    Стадия заболеванияАТ IgMАТ IgGАТ IgM+IgG
    Острая (I)45–70%40–80%90%
    Подострая (II)30–60%65–100%90–100%
    Хроническая (III)5–50%до 100%до 100%

    При лабораторном подтверждении нейроборрелиоза для определения наличия интратекального синтеза АТ проводится выявление специфических АТ в сыворотке крови и СМЖ. Относительное увеличение концентрации специфических IgG в ЦНС можно определить путем вычисления ликвор-сывороточного индекса (ЛСИ). Для этой цели определяют концентрацию специфических Ig (титр) и общих Ig (г/л) в сыворотке крови и СМЖ.

    ЛСИ = (специфические IgG (СМЖ) * общие IgG (сыворотка)) / (общие IgG (СМЖ) * специфические IgG (сыворотка))

    Значения ЛСИ больше 2-х расцениваются как положительные и указывают на наличие синтеза специфических иммуноглобулинов клетками глиальной ткани.

    Ложноположительные результаты при выявлении АТ методами РНИФ и ИФА могут быть получены у больных с другими спирохетозами: сифилисом и лептоспирозом, у пациентов с ревматоидным артритом неборрелиозной этиологии и другими системными заболеваниями, у пациентов с герпес-вирусной инфекцией, вызванной ЦМВ и вирусом Эпштейн-Барр, а также у беременных.

    Для подтверждения специфичности результатов выявления АТ методами РНИФ и ИФА используют метод ИБ, который позволяет обнаружить специфические АТ к определенным белкам возбудителя. В качестве АГ в основном используются рекомбинантные белки p83-100, p58, p41i, p39 (BmpA), OspC (p20-25), p17 (DbpA), BBK32, VlsE, полученные для двух, а иногда и для трех видов боррелий.

    Микроскопия (световая, фазовоконтрастная, темнопольная, электронная) биологического материала (СМЖ, кровь, синовиальная жидкость, биоптаты тканей) не имеет широкого применения из-за низкой концентрации возбудителя (в среднем концентрация боррелий в 1 мл биологического материала не превышает 10 000 микробных клеток), за исключением биоптатов кожи. В основном микроскопические исследования используются при контроле культуральных методов и как один из методов при оценке инфицированности боррелиями иксодовых клещей.

    При применении для изоляции боррелий культурального метода в качестве среды для культивирования используется модифицированная среда BSK (BarbourStoenner- Kelly). Важным условием является получение образцов биологического материала до начала антибиотикотерапии. Из кожных биоптатов удается изолировать боррелии в 50–60% случаев при наличии клещевой мигрирующей эритемы и в 90% – при хроническом атрофическом акродерматите. При исследовании крови, СМЖ, синовиальной жидкости процент положительных результатов ниже – в среднем 20%. Этот метод не имеет широкого практического применения как диагностический в виду его длительности (от 3–4 до 10 недель) и высокой стоимости.

    Выявление ДНК боррелий с использованием молекулярно-биологических методов (преимущественно ПЦР) целесообразно применять в комплексе с выявлением АТ. Прямым показанием для применения ПЦР являются боррелиозные менингиты, менингоэнцефалиты, наличие атипичной эритемы, рефрактерные артриты у пациентов с наличием АТ к боррелиям. Диагностическая чувствительность данного метода составляет от 20 до 35% при исследовании крови в остром периоде на первой неделе заболевания, от 20 до 80% при исследовании синовиальной жидкости при развитии Лайм-артрита и около 10–30% – при исследовании СМЖ при нейроборрелиозе. Метод позволяет также идентифицировать вид боррелий, вызвавших заболевание. Обнаружение ДНК и РНК боррелий методом ПЦР может быть выполнено во всех видах биологического материала (кровь, моча, биоптаты тканей, цереброспинальная и суставная жидкости и др.).

    Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение ДНК патогенных боррелий комплекса B.burgdorferi sl в крови, СМЖ, синовиальной жидкости или моче пациента является основанием для предварительной постановки диагноза ИКБ. Выявление специфических АТ в образцах крови, взятых в динамике (сероконверсия в парных сыворотках крови) служит подтверждением этиологии заболевания.

    Интерпретация результатов ИБ в основном сводится к алгоритму, представленному в таблицах .

    Оценка результатов при выявлении антител IgM методом иммуноблота

    ОтрицательныйПоложительныйНеопределенный
    Не выявлены АТ ни к одному из АГ. Выявлены АТ только к АГ p83-100Выявлены АТ к белку OspC. Выявлены АТ как минимум к двум АГ из группы: p41, VlsE, p17Выявлены АТ только к одному АГ из группы p41, VlsE, p17 в сочетании или без АТ к АГ р58, p39, BBK32 или выявлены АТ к любому количеству АГ р58, p39, BBK32

    Оценка результатов при выявлении антител IgG методом иммуноблота

    ОтрицательныйПоложительныйНеопределенный
    Не выявлены АТ ни к одному из АГ. Выявлены АТ только к АГ p17Выявлены АТ к белку VlsE. Выявлены АТ как минимум к двум АГ из группы: p83-100, p58, p41, p39, BBK32, OspC, p17Выявлены АТ только к одному АГ из группы: p83-100, p58, p41, p39, BBK32, OspC

    Комплекс антител, выявляемый на разных стадиях

    Стадия заболеванияАГ, к которым выявлены АТ IgMАГ, к которым выявлены АТ IgG
    Острая (I)OspC, p41, p17, VlsEP41, BBK32, p17, OspC, VlsE
    Подострая (II)OspC, p41, p17, BBK32, VlsEp17, p41, VlsE, OspC, BBK32, p58
    Хроническая (III)OspC, p41, VlsE, P39, p58p17, BBK32, p41, p58, VlsE, p83-100, OspC, p39

    Определенные сложности использования для диагностики ИКБ методов выявления специфических иммуноглобулинов связаны с присутствием анамнестических АТ у большой части населения, проживающего на эндемичной территории, и низкой скоростью роста уровня АТ, что является особенностью боррелиозной инфекции. Очень медленные изменения уровня АТ к боррелиям (как повышение, так и снижение) также не позволяют использовать оценку уровня АТ для контроля эффективности терапии. Учитывая замедленное образование АТ при боррелиозах, при получении однократного отрицательного результата повторяют исследование в пробе крови, взятой через месяц.

Ссылка на основную публикацию